立陶宛 - 立陶宛兽医研究院和赫尔辛基大学的科学家研究出了一种简单的荧光分析方法,可以对用于人工授精的公猪精液进行评估。
以前已有若干研究显示,精子细胞膜的完整性与受精率存在相关。在这篇发表在Acta Veterinaria Scandinavica的研究当中,立陶宛兽医研究院的Sutkeviciene和其它作者一同描述了一个简单的荧光分析方法。他们用荧光DNA染料对人工制造的细胞膜破损的镜子细胞进行定时染色,观察荧光强度。
方法
利用不能穿透细胞膜的染料Hoechst 33258 ( H258)和碘化丙啶(PI)来测量细胞膜破裂的精子细胞核的荧光强度,利用能够穿透细胞膜的染料Hoechst 33342 (H342)来测量完整精子细胞核的荧光强度。
人工授精单剂中精子浓度在31.2× 106至50 × 106/ml之间,平均为3550 × 106/ml。
每头公猪连续采集三次精液,中间间隔一周。把第一次授精后60天内未返情比例(NR%)和经产母猪窝产仔数(总产仔数)当作衡量受胎率的指标。
结果
用H258和H342染色处理的精液荧光强度与经产母猪窝产仔数呈显著相关,PI染色的荧光强度的相关则不显著,其中H258为r=-0.68 (P<0.01),H258为r=-0.69 (P<0.01),PI为r=-0.38, (P=0.11)。
结论
膜损坏精子H258染色和膜完整精子H342染色荧光读数的增加与人工授精后窝产仔数的减少存在相关关系。
这个发现显示,可以利用精子细胞核的荧光特性作为评估人工授精精液的授孕潜力,Sutkeviciene和合作作者说。