溶菌酶具有酶的特性,广泛用于食品防腐,并且是抑菌剂、抗菌剂的原料。利用蛋清提取溶菌酶,生产投资相对较少,且加工方法简单,市场销路广,是农村发展商品生产开发蛋品资源的有效途径。
一、备料 以蛋清、树脂、磷酸、氢氧化钠、盐酸、氯化钠、无水丙酮、五氧化二磷为原料。取新鲜或冰冻的蛋清70千克,调节pH值在8左右,用铜质筛过滤,除去蛋清中的脐带及其他物质。
二、吸附 加冷水冷却并搅拌蛋清,待温度降到5度,缓慢加入724型树脂10千克,温度控制在5度-10℃,再连续搅拌5小时,蛋清液放入冷库,于0度-10度下过夜。
三、洗脱 将上层蛋清液倒出,留下的树脂用清水洗去附着的蛋白质。共洗涤4次,最后过滤抽干水分。用24公斤每升0.15摩尔的磷酸缓冲液分3次加入树脂中搅拌每次搅拌15分钟后抽滤去水。然后用10%的硫酸铵水溶液18千克分次洗脱溶西酶。合并洗脱液加入相当于洗脱液32%的固体硫酸铵,析出白色沉淀。
四、透析 将沉淀溶解于1.5倍量的蒸馏水中,在冷库内透析48小时左右,除去大部分硫酸铵。
五、盐析 将透析后的溶液过滤,得澄清透析液,用滴管加入氢氧化钠水溶液,小心调节pH值到8.5—9,如出现白色沉淀应立即离心除去。然后在搅拌机中加人每升3摩尔的盐酸,调节PH值为3-4,然后加入体积量5%的固体氯化钠,生成白色沉淀。在0度-10度冷库中放置8小时后抽滤得到溶菌酶沉淀。
六、干燥 在沉淀内加入10倍量无水丙酮,并搅拌沉淀,使之松散,在冷却处放置数小时,滤去丙酮,得到沉淀,再用五氧化二磷真空干燥后即得到溶菌酶酶粉剂原料。